ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИЕ СВОЙСТВА ЭНДОГЕННОГО ИНТЕРФЕРОНА У ТЕЛЯТ
И.А.ОСМАЕВ, К.П.ЮРОВ ВНИИЭВ
им. Я. Р. Коваленко М.П.НЕУСТРОЕВ Якутский НИИСХ
Со времени открытия Айзеке и Линденман (1957) интерферона установлен широкий спектр биологической активности интерфероновых белков, которые наряду с другими цитокинами обладают многочисленными свойствами, включая антивирусное действие, регулирование взаимодействия главных интегративных систем организма - нервной, иммунной, эндокринной.
Система интерферона не имеет специализированных клеток или органов, она существует в каждой клетке, которая в случае вирусной инфекции должна быть защищена от заражения вирусом (Ф.И. Ершов, О.И. Киселев, 2003). Различают три основных типа интерферонов: альфа - а, бета - b и гамма - у.
Создание технологии получения генно-инженерных интерферонов позволило, в частности, выяснить ответственность каждого белка за тот или другой защитный эффект. Так, у-интерферон является активатором макрофагов и усиливает их противоопухолевую активность, подавляет внутриклеточных паразитов. При вирусной инфекции он вызывает изменения поверхности клеточной мембраны, что защищает клетки от проникновения вируса, нарушает внутриклеточный синтез вирусов вследствие усиления образования фермента олигоаденилатсинтетазы и др.
Благодаря рекомбинантной технологии в медицинскую практику вошли чистые препараты интерферонов, обладающие широким спектром действия у человека. Не меньшее значение феномен вирусной интерференции имеет и для ветеринарии. Однако вследствие ряда объективных причин во многих случаях использование чистых интерферонов на животных экономически мало оправдано или неэффективно, несмотря на все их положительные свойства в отношении антивирусного, антибактериального, противоопухолевого действия или гармонизации гомеостаза, в том числе иммуногенеза. Наиболее перспективным направлением в ветеринарии, по нашему мнению, является изыскание активных индукторов эндогенного интерферона, в первую очередь активных природных индукторов защитных белков клетки. Суммарный эффект защитного действия а-, b-, у- интерферонов в организме как результат применения удачно подобранного индуктора может быть использован в комплексе профилактических и лечебных мероприятий при вирусных инфекциях сельскохозяйственных животных.
Все это определило цель нашего исследования - оценить влияние индуцированного эндогенного интерферона на формирование защитных реакций организма при вакцинации телят против инфекционного ринотрахеита (ИРТ) и парагриппа (ПГ-3), используя в качестве индуктора культуру В. subtilis.
Материалы и методы. Микроорганизмы: культура В. subtilis, выращенная на МПБ с концентрацией бактериальных клеток 2 млрд/мл (коммерческий препарат сахабактисубтил); вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, штамм ТК - А; агглютинирующий антиген ПГ-3; вакцина, ассоциированная против ИРТ и ПГ-3, производство Ставропольской биофабрики; вирус везикулярного стоматита (ВВС), штамм Индиана; животные: телята в возрасте 5,5 - 6 мес; культура клеток: MDBK, на среде Игла Мем с 10 % сыворотки крупного рогатого скота.
Шесть телят разделили на три равные группы. Животным первой группы подкожно вводили по 3 мл культуры В. subtilis, а через 3 дня ассоциированную вакцину против ринотрахеита (штамм ТК - А) и ПГ-3, телятам второй группы - культуру В. subtilis (индуктор интерферона) одновременно с вакцинным вирусом, в третьей (положительный контроль) прививали только вакцину против ринотрахеита.
До вакцинации и введения культуры В. subtilis у телят определяли к вирусу ИРТ и ПГ-3 иммунный (в РН и РТГА) и интерфероновый статус.
Первые 6 дней опыта от телят ежедневно получали пробы крови, в последующем кровь брали на 30-й и 75-й дни соответственно.
Для определения общего (суммарного) интерферона сыворотку крови прогревали при 56 - 57 °С в течение 1 ч. Наличие интерферона оценивали по ингибированию репродукции ВВС в культуре клеток MDBK, взятого в титре 100 ТС05о/мл. Реакцию нейтрализации (РН) с вирусом ИРТ проводили по стандартной методике с использованием пластиковых 96 луночных микропанелей фирмы Nunc.
За положительный результат принимали разведение сыворотки крови при котором репродукция вируса подавляется на 50 %.
Результаты и обсуждение. В предварительном опыте на 2 телятах было показано, что подкожное введение культуры В. subtilis вызывает образование у телят эндогенного интерферона. В течение последующих 3 сут (срок наблюдения) титр интерферона в крови телят составил 1:16 против 1OOTCD5oMn ВВС и снизился на вторые сутки до 1:8. Вирусы ИРТ и ПГ-3 являются достаточно активными индукторами интерферона. В нашем опыте прививка телятам третьей группы ассоциированной вакцины стимулировала у них продукцию этого ингибитора на 4-е сутки до титра 3 log2 с последующим снижением к 30-му дню.
В первой и второй группах введение вакцины и культуры В. subtilis приводило к существенному снижению титра интерферона (1,5 - 2,5 log2) в те же сроки исследования, с последующим повышением его уровня на 3-й и 4-е сутки.
Использованные в данном опыте телята имели гуморальные антитела к вирусам ИРТ и ПГ-3, что было установлено исследованием их сывороток крови в РН и РТГА соответственно.
Вакцинация этих телят ассоциированной вакциной привела к снижению через 48 ч титра антител к обоим вирусам. При этом наибольшее снижение уровня антител отмечали у телят третьей группы животных, которым вводили В. subtilis, уменьшение количества антител было менее выражено, особенно при одновременном введении вакцины и индуктора интерферона (ИИ). В последующие сроки наблюдения уровень антител к вирусам ИРТ и ПГ-3 восстанавливался и на 3 - 4-е сутки превышал исходные показатели в 4 - 8 раз.
Интерферониндуцирующая активность свойственна весьма пестрой группе высоко- и низкомолекулярных природных и синтетических соединений (Ф.И.Ершов, 1998; В.В.Зверев и соавт., 2002).
В ветеринарной практике преимущества ИИ перед экзогенными интерферонами определяется несколькими факторами. При использовании ИИ образуется собственный интерферон (ИФН), который в отличие от рекомбинантных не обладает антигенностью, при однократном введении индуктор обеспечивает длительную продукцию ИФН, тогда как для достижения подобных концентраций необходимы многократные инъекции экзогенного ИФН, что в большинстве случаев невозможно в условиях животноводческих хозяйств. Использование ИИ снижает риск развития аутоиммунных реакций и оказывает иммуно-моделирующее влияние (Ф.И.Ершов и соавт, 1983; Ф.И.Ершов, 1998).
В наших опытах показано, что В. subtilis (ИИ) индуцирует образование ИФН как в виде монопрепарата, так и при совместном парентеральном введении с двухвалентной (ассоциированой) вакциной ИРТ и ПГ-3 крупного рогатого скота. При одновременном введении отмечают выраженный иммуностимулирующий эффект в отношении обоих вирусов, что регистрируется по увеличению в 4 - 8 раз титра вирусспецифических сывороточных антител.
Заключение. Эндогенный интерферон, образующийся у телят в ответ на парентеральное введение культуры В. subtilis, влияет на динамику иммунного ответа к вирусам ИРТ и ПГ-3. Более выраженное повышение иммунной реакции отмечено при одновременном введении вакцины ИРТ и ПГ-3 и индуктора интерферона (В. subtilis).
журнал "Ветеринария" №01 2007
№ кошелька: 410011987169836